Er det mulig med feil i PCR-diagnostikk? Falske negative og falske positive resultater av PCR

Symptomer

Ulike forhold kan påvirke innhenting av falske resultater i PCR-diagnostikk, både falsk positiv og falsk negativ.

Anvendelse av polymerasekjedereaksjonsmetoden - PCR - krever strengest iakttagelse av alle stadier av analysen, alt fra å ta analysen av en lege for å tolke resultatene av analysen. Hvordan informativ PCR analyse avhenger av mange forhold.

  • Falske positive testresultater kan skyldes at blodet kommer inn i materialet (smør eller skraper urinrøret).
  • Lignende falske positive resultater av PCR-analyse oppnås på grunn av ikke penetrering av epitelceller i materialet, men til innholdet av en stor mengde fullstendig ikke-informativ slim.
  • Feil transport og lagring av de oppnådde prøvene har en effekt på å oppnå falske resultater av DNA-analyse. Infeksjonens DNA i dette tilfellet kan bli ødelagt og som et resultat et falsk-negativt resultat.
  • Forstyrrelse av sterilitet under PCR-diagnostikk er en annen årsak til falsk positiv PCR. Alienbakterier kan komme inn i pasientens samlede materiale fra legenes hender, fra klær, fra glass eller forurensede instrumenter, gjenbrukbare redskaper. Som et resultat vil en "ikke-eksisterende" infeksjon bli oppdaget.
  • Uvirksomhet av reagenser. Et ikke-utstyrt og tidlig laboratorium, hvor leger "lukker øynene" til uegnethet av reagenser, er en annen og alvorlige grunner til en falsk diagnose. Dette reduserer selvsagt kostnadene ved laboratoriediagnostikk, men det kan ikke bare påvirke resultatene.

I et forsøk på å unngå slike feil, tar medisinske senter "Euromedprestige" laboratoriediagnostikk svært alvorlig: de bruker kun engangsmaterialer i alle stadier av analysen og observerer de nødvendige tiltak for å opprettholde fullstendig sterilitet i laboratoriet og det medisinske kontoret. Vi benytter bare leger av høyeste kategori og erfarne teknikere, som regelmessig forbedrer sine ferdigheter for ikke å kurere ikke-eksisterende sykdommer, men for å oppnå pålitelige resultater.

Falsk positiv PCR

Våre fordeler:

  • Billig legeutnevnelse fra 900 rubler
  • Krevende analyser på behandlingsdagen fra 20 minutter til 1 dag
  • Nær 5 minutter fra t-banestasjonen Varshavskaya og Chistye Prudy
  • Vi jobber komfortabelt hver dag fra 9 til 21 hver dag (inkludert helligdager)
  • Anonymt!

Polymerase kjedereaksjon er kanskje en av de mest sensitive og mest nøyaktige metoder for å diagnostisere ulike smittsomme sykdommer, spesielt seksuelt overførbare sykdommer. Å bestemme selv en liten mengde DNA-partikler av bakterier, virus, sopp, PCR er en ganske spesifikk metode som sjelden gir falske positive resultater.

Et falskt positivt resultat betyr at det faktisk ikke er infeksjon, og reaksjonen er positiv.

Men selv med 98-99% nøyaktighet, inneholder PCR noen ganger også feil svar som nesten ikke er forbundet med selve reaksjonen, men mer med brudd på foreløpig stadium.

Årsaker til falsk positiv PCR analyse:

  • Vilkårene for kontrolltester etter behandling av kjønnsinfeksjoner ble ikke oppfylt. Faktum er at de fleste infeksjoner er inne i cellene eller festet på overflaten av deres membraner. Under en fullverdig behandling dør kausjonsmiddelet til en STI, men dens genom (DNA) partikler forblir i noen tid i vertsens kropp. Det tar tid, ca 3 uker, for disse cellene skal erstattes av nye som ikke er i kontakt med det smittsomme stoffet, da er det tatt kontroll. Hvis vi tar analysen tidligere, vil PCR på grunn av sin høye følsomhet bestemme DNA fra allerede døde bakterier og indikere tilstedeværelsen av patogenet, som vil være falsk positiv, siden infeksjonen allerede har dødd.
    Våre leger har tilstrekkelig kunnskap innen STD diagnostikk og møte tidsfrister, derfor er slike situasjoner i klinikken utelukket fra privat praksis.
  • DNA-infeksjon av seksuelt overførbare infeksjoner i testrøret fra en venereologs hender, med hansker og urologiske prober.
    Denne faktoren er utelukket, siden bare engangshansker, testrør og sonder brukes til å samle materiale.
  • False-positive resultater er ekstremt sjeldne i nærvær av nært beslektede mikroorganismer i skrapingen. Det vil si at analysatoren avslører tilstedeværelsen av en patogen bakterie som forårsaker en veneral sykdom, men det er faktisk en komponent i normal mikroflora. Men dette problemet har lenge blitt løst ved innføring av mer moderne og spesifikke testsystemer.
  • Forurensning eller DNA-infeksjon av infeksjoner i testrøret i laboratorietrinnet i studien var også mulig, men praktisk talt ekskludert ved riktig organisering av diagnostisk prosess og personellopplæring.

I alle fall blir diagnosen alltid laget ikke bare på grunnlag av resultatene av en enkelt analyse. Den endelige diagnosen av en seksuelt overførbar sykdom er en kombinasjon av klager, klinisk undersøkelse og en kombinasjon av ulike laboratorie- og instrumentelle metoder.

Hvis urolog, gynekolog eller venereologist vises tvil om riktigheten av de PCR-resultatene viste en mismatch eller eksisterende kliniske og laboratorie diagnostiske data med hverandre, legen alltid anbefale videre undersøkelse ved hjelp av ELISA-metoder, NASBA, avlinger, for å avklare situasjonen.

I våre klinikker er det alle metoder for undersøkelse av menn og kvinner tilgjengelig for moderne medisin. Derfor er etableringen av falske diagnoser av STI utelukket.

Legen i klinikken "Privat praksis" dermatovenerolog, urolog Volokhov EA snakker om analysen av PCR for infeksjon.

Medisinsk senter ved Chistye Prudy og Varshavka

Resepsjon i våre klinikker daglig fra 9.00 til 21.00

I den sørlige administrative Okrug og sør-vestlige administrative Okrug - T-banestasjonen Warszawa, Kakhovskaya, Sevastopolskaya - ul. Bolotnikovskaya bygningen 5 bldg 2, tlf. 8-499-317-29-72

I sentrum (CAO) - metro Chistye Prudy, Turgenevskaya, Lubyanka - Krivokolenny Lane House 10, bygning 9, tlf. 8-495-980-13-16

spørsmål

Spørsmål: Hvor nøyaktig er PCR-diagnosen?

Hva er nøyaktigheten av PCR-diagnostikk?


Nøyaktigheten av PCR (polymerasekjede reaksjon) diagnostikk for visse infeksjoner varierer fra 99 til 100 prosent.
Det er ekstremt sjeldent at PCR gir falsk-negative resultater, og gir nesten ikke falske positive resultater. Et falsk-negativt resultat er når analysen viser fraværet av en patogen mikroorganisme (infeksjonskilde), når den faktisk eksisterer.
Dette kan oppstå i tilfeller der:

  • Feil valgt biologisk materiale. For eksempel, når en urin undersøkes under en cytomegalovirusinfeksjon (og ikke en halspinne eller blodsprøyt) eller ved diagnostisering av en infeksjon i CNS (sentralnervesystemet), blir blod brukt i stedet for cerebrospinalvæske.
  • Reglene for innsamling av biomaterialer ble ikke fulgt. Hvis en person gjennomgikk en antibiotikabehandling mens han tok tester for PCR, tok han uroseptika og antivirale legemidler. På samme måte kan falsk-negative tester oppstå hvis pasienten urinert, hadde sex dagen før, eller tok medisiner i form av et vaginalt suppositorium (suppositorium) før det ble smurt eller urin.
  • Kilden til infeksjon undersøkes, som i løpet av sin vitale aktivitet kan endres. I hjertet av enhver mikroorganisme er evnen til å forandre seg. Noen virus kan skaffe seg DNA-nivå (deoksyribonukleinsyre) variabilitet. For eksempel har influensaviruset en god evne til å "mutere" og endre sin genetiske informasjon. Dermed kan ikke PCR avsløre infeksjonskilden, siden genomet (et sett med gener) var gjenstand for endring.

Et falskt positivt resultat (analysen viser tilstedeværelsen av infeksjon når det er ingen) er ikke typisk for PCR-diagnostikk og finnes bare i tilfeller der infeksjonen allerede er "død", men dens døde celler sirkulerer i kroppen. Manglende evne til å skille en "død" infeksjon fra en aktiv (levende) infeksjon er en av ulempene ved PCR-metoden. I tilfelle at en person allerede har hatt en viss infeksjon (sykdommen har blitt behandlet og drept av antibakterielle eller antivirale midler), vil PCR-analysen fortsatt gi et positivt resultat for patogenet, selv om det allerede er "dødt".

Når en falsk positiv test for syfilis er mulig

Analysen av definisjonen av syfilis en person må passere nesten oftere enn noen: ansettelse, medisinsk provisjon, forebyggende undersøkelser, graviditet. Implementeringen av disse studiene er nødvendig - de lar deg identifisere sykdommen i de tidlige stadiene, når behandlingen vil ha høyest effektivitet.

Et positivt resultat blir ofte forvirret av en person, spesielt i fravær av noen grunn. Deteksjon av falsk positiv syfilis er ganske hyppig, og derfor er det ikke nødvendig å panikk i forkant av tiden. Ifølge informasjon fra forskjellige kilder kan opptil 30% av primærforskningen gi feil resultat. Det er mange grunner til dette fenomenet: endringer i kroppens tilstand, somatiske sykdommer. For bedre å forstå hvorfor de ser ut, er det verdt å forstå forståelsen av studien mer grundig.

Typer av syfilisforsøk

Kliniske forskningsmetoder forbedrer seg raskt hvert år. Med utviklingen av nye diagnostiske metoder blir falske positiver for syfilis mindre vanlige. Om nødvendig kan diagnosen inkludere flere forskjellige metoder - dette gir deg det mest pålitelige resultatet.

Ikke-treponeale forskningsmetoder

Disse teknikkene er rettet mot å identifisere proteiner som dannes som et resultat av aktiviteten av den bleke spirochete. De er rettet mot å bestemme "sporene" av patogenet. Slike metoder har en relativt høy prosentandel av feil (opptil 10%). Slike teknikker er ikke-spesifikke, men tillater titer av antistoffer for å bestemme infeksjonsgraden.

Wasserman RW Reaction

Den vanligste analysen, som utføres for å identifisere blek treponema, er en serologisk blodprøve. Wasserman-reaksjonen gjør det mulig å fastslå forekomsten av sykdommen på bare noen få minutter. Derfor brukes denne teknikken ofte i laboratorier - det krever ikke mye tid og har en relativt lav pris.

Spinalvæske eller blod brukes til å utføre analysen. Prøvetaking av det studerte materialet kan utføres fra en finger (hvis analysen er bare en) eller fra en vene (hvis flere studier er påkrevd). Som et resultat av analysen kan det ikke bare være falsk positiv, men også falsk negativ. Det er mulig under følgende forhold:

  • tidlig stadium av infeksjon, når antall treponem i kroppen fortsatt er lavt;
  • kronisk sykdom i remissiefasen, når antall antistoffer er redusert.

Vær oppmerksom! Et falsk-negativt resultat oppstår ekstremt sjelden, og derfor, hvis det er minst ett pluss poeng ut av fire, er det nødvendig å gjennomgå en ytterligere undersøkelse.

Mottaker mikroreaksjon (MR)

Denne forskningsmetoden er basert på antigen-antistoffreaksjonen. Det krever en liten mengde materiale å utføre. Det er rettet mot å identifisere antilipidnye antistoffer, som er produsert i ferd med å ødelegge treponema celler. For studien brukes som pasientens blod og cerebrospinalvæske.

Siden ødeleggelsen av celler kan forekomme ikke bare i syfilis, brukes analysen som kvalifiserende og ikke bekreftende. Det er to analoger av denne teknikken:

  • Mikroskopisk test (VDRL). Inaktivert serum brukes til analyse. Hvis nervesystemet er skadet av syfilis, brukes cerebrospinalvæske som testmateriale.
  • Makroskopisk test (RPR). Det regnes som en metode for rask diagnose. En visuell beregning av plasma-reaginer brukes.

Den gitte reaksjonen ved manglende overholdelse av nødvendig sterilitet kan vise et falskt positivt resultat. Utseendet til en slik analyse er også mulig med ikke-spesifikk vevskader, noe som medfører ødeleggelse av lipider. Hvis det er et positivt resultat, anbefales det at en treponemal test utføres for å bekrefte.

Treponemal forskningsmetoder

Denne kategorien av analyser gir de mest nøyaktige dataene, og det er sjelden falske positive resultater. Forskning er rettet mot å identifisere spesifikke proteiner som utskilles av kroppen som respons på infeksjon. Disse teknikkene har høyere kostnader, og brukes derfor som bekreftende, men ikke kvalifiserende.

Spesifikke antistoffer begynner å bli produsert av kroppen bare noen få uker etter infeksjon med treponema. De kan vedvare i lengre tid for å kurere sykdommen. Derfor kan spesifikke tester vise positive resultater i lang tid etter remisjon.

Vær oppmerksom! Med en positiv RW og negativ spesifikk, brukes en omvendelse etter noen uker.

ELISA (ELISA, EIA)

Basert på en vurdering av nivået av immunglobuliner av klassen IgA, IgB og IgM. De to første typene proteiner er produsert i kroppen allerede fra 2 ukers infeksjon, og IgM - en måned etter infeksjon.

Tolkning av analysen utføres på grunnlag av forholdet mellom tilstedeværelsen av immunglobuliner:

  • bare IgA oppdaget - ikke mer enn 14 dager har gått siden infeksjonen;
  • IgA og IgB ble påvist - infeksjon skjedde 14 til 28 dager siden;
  • fant alle tre typer - syfilis i kroppen i mer enn 28 dager;
  • bare IgM detekteres - sen syfilis.

Tilstedeværelsen av IgM kan være et tegn på en allerede herdet syfilis - syntesen av IgM-immunoglobuliner kan fortsette i flere måneder etter remisjon.

Immunofluorescensreaktjon (FTA)

Brukes til å bekrefte infeksjon i de tidligste stadiene. For studien blir blod tatt fra finger eller blodåre. Resultatet ligner RW-analysen, hvor en minus er indikert, eller fra 1 til 4 plusser. Hvis det er minst ett pluss, kan ytterligere undersøkelser foreskrives.

Falske positive resultater er svært sjeldne når de utfører RIF - de kan være hos gravide, så vel som hos pasienter med bindevevssykdommer.

Reaksjon av passiv agglutinering (RPHA, TPHA)

Antistofftiter gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av syfilis og dets stadium. Pålitelige data denne teknikken gir fra 28 dager etter infeksjon. Blod fra finger eller blodår brukes til evaluering. Øke mengden antistoffer betyr et senere stadium av sykdommen.

De mest nøyaktige forskningsmetodene

Analysene av denne gruppen er svært sensitive, og derfor er feilen i resultatene ekstremt lav. De er preget av en høyere kostnad, i sammenligning med andre metoder, og en mer komplisert utførelsesteknikk.

Polymerase Chain Reaction (PCR)

PCR-analyse regnes som en av de mest nøyaktige. Det tar sikte på å identifisere patogene DNA-steder i menneskekroppen. Metoden krever spesialisert utstyr og reagenser, og brukes derfor i sjeldne tilfeller.

Imunoblotting

Kombinert forskningsmetode. Regissert til bestemmelse av immunoglobuliner i pasientens serum. Analysen verifiserer tilstedeværelsen av et kompleks av antistoffer, ifølge hvilke diagnosen er etablert. Ved denne metoden blir elektroforese brukt, ved hjelp av hvilken immunodeterminanter separeres, og ELISA-reaksjon, som utviser separerte punkter.

Reaksjonen med immobilisering av blek treponema (RIBT)

Meget spesifikk analyse som bestemmer serumets respons til blek treponema. Det er mye brukt over hele verden, fordi det har stor sannsynlighet for et nøyaktig resultat. Spesielle antistoffer (immunomobilizin) hos en pasient med syfilis kan immobilisere treponema. Det finnes ingen slike antistoffer i blodet av en sunn person. Det er på nærvær / fravær av denne evnen og forskningsmetodikken er basert.

RIBT brukes til å identifisere de forskjellige syfilisartypene der Wasserman reaksjon gir negative resultater - skade på nervesystemet, indre organer, skjulte former for sykdommen. Et falskt positivt resultat i CIS-landene er ekstremt sjeldent. Årsaken til forekomsten kan være sarkoidose, spedalskhet.

Årsaker til falske positive resultater

Wasserman-reaksjonen kan definere et "akutt" og "kronisk" falskt positivt resultat. Dens alvorlighetsgrad avhenger av naturen av endringer i den menneskelige tilstanden. Vis scenen for forverring RW kan i slike tilfeller:

  • smittsomme sykdommer i akutt stadium;
  • traumatiske skader;
  • hjerteinfarkt;
  • Innføringen av noen vaksine noen dager før testen;
  • matforgiftning.

Disse forholdene er preget av økt immunsystemfunksjon, noe som fører til økt produksjon av antistoffer. De er feilaktig anerkjent i reaksjonen som antistoffer mot treponema, og derfor oppstår et positivt resultat.

I nærvær av patologier av kronisk natur produserer immunsystemet et stort antall ikke-spesifikke antistoffer som kan forårsake en reaksjon. I RW kan denne tilstanden vise et falskt positivt resultat. Derfor er det verdt å advare legen om følgende sykdommer:

  • kroniske patologier av bindevev;
  • tuberkulose;
  • kroniske sykdommer av viral etiologi: HIV, hepatitt B, C, D;
  • kronisk leversykdom;
  • autoimmun patologi.

Med alderen i pasientens kropp, reduserer redoksreaksjonene. Aldring av vev kan også vise et falskt positivt resultat, og derfor foreskrives mer nøyaktige forskningsmetoder for eldre pasienter.

Vær oppmerksom! I tilfelle av en positiv Wasserman-reaksjon, utføres ytterligere forskning som muliggjør et mer nøyaktig bilde.

sjekker

Re-test for syfilis utføres med tvilsomme resultater av screeningsstudier. Han er utnevnt i nærvær av ett eller to kryss - denne analysen krever ytterligere verifisering. Studien kan gi falske positive resultater i flere tilfeller:

  • Tidlig stadium av sykdommen. Før utseendet på en hard chancre, er mengden immunoglobuliner i kroppen ganske lav.
  • Sent stadium av sykdommen. Mer enn 2 år har gått siden infeksjonen, og antistofftiter begynte gradvis å avta.

Gjentatt analyse, som utføres i 2-3 uker, viser nøyaktig om det er en sykdom. Hvis det er et positivt resultat en gang, benyttes ytterligere klargjøringsteknikker.

Graviditetstester

En av de mest uventede kan være en positiv test for syfilis hos gravide kvinner, spesielt hvis kvinnen ikke forandret partneren. En slik situasjon frykter ofte fremtidige mødre, da treponema kan påvirke intrauterin utvikling av en baby negativt.

En undersøkelsesundersøkelse under graviditet utføres flere ganger:

  • når det blir registrert om 12 uker
  • start 3 trimester, ved 30 uker;
  • før fødsel.

Dette er minimumsforskningen. En falsk positiv test for syfilis kan oppstå på grunn av en restrukturering av kroppen som oppstår under graviditeten. Når en kvinne bærer et barn, produserer immunforsvaret en stor mengde antistoffer - dette er en evolusjonær enhet for å beskytte barnet i det første år av livet.

Under graviditet foreskrive ytterligere avklaringsanalyse, som preges av større nøyaktighet. Hvis en kontrollundersøkelse viser tilstedeværelsen av et patogen i kroppen, er det nødvendig med behandling. Effekten av terapi på en voksende organisme er vesentlig mindre enn den potensielle skaden fra treponema.

Hvordan forberede dere på analysen?

En måte å forhindre et feil resultat på er å forberede seg på testing. På grunn av feil forberedelse er reaksjoner mulig som følge av produksjon av ikke-spesifikke antistoffer, noe som fører til utseende av feil resultat.

  • Analysen må tas på tom mage. Du kan bare bruke rent vann.
  • En dag før blodprøven er det nødvendig å eliminere alkohol helt - det skaper en ekstra belastning på leveren, noe som kan føre til et positivt resultat.
  • Det anbefales på kvelden å forlate bruken av fete og stekte matvarer, krydrede retter og mange krydder.
  • Minst 60 minutter før analysen anbefales det å avstå fra røyking.
  • Før du tar blod fra en vene, må du hvile i 10-15 minutter i beredskapsrommet.
  • Kvinner anbefales ikke å donere blod under menstruasjon.
  • Det er umulig å utføre analysen etter radiologisk undersøkelse, fysioterapeutiske prosedyrer.
  • Det er forbudt å donere blod for syfilis i perioden med forverring av smittsomme sykdommer.

Vær oppmerksom! Hvis pasienten tar medisiner, bør han konsultere lege før han gjennomfører studien, det kan være nødvendig å ta en pause i flere dager mellom å ta medisiner og analyse.

Hva skal jeg gjøre når jeg bekrefter syfilis?

Ikke bekymre deg når du mottar en primær screening med positive resultater. Falsk syfilis er lett bestemt av gjentatt forskning. Hvis diagnosen ble bekreftet, må du imidlertid gjøre noe:

  • undersøkelse av den seksuelle partneren med en dermatovenerolog
  • undersøkelse av nære slektninger;
  • gjennomføringen av forebyggende behandling for å forhindre infeksjon i slektninger;
  • Registrering av syklisten for behandlingsperioden - sykelisten inneholder ikke opplysninger om diagnosen, garanterer konfidensialitet;
  • Ved slutten av behandlingsforløpet utstedes et spesialbevis - du må ha det med deg for å unngå spørsmål om falske positive resultater de neste månedene.

Et positivt resultat for syfilis er ikke alltid pålitelig. Derfor, ikke bekymre deg, og det anbefales å vente på ytterligere forskning. Riktig behandling, som ble startet i tide, garanterer rask gjenoppretting med minimum restvirkninger.

Er det mulig med feil i PCR-diagnostikk? Falske negative og falske positive resultater av PCR

Del ny informasjon i:

Ulike forhold kan påvirke innhenting av falske resultater i PCR-diagnostikk, både falsk positiv og falsk negativ.

Anvendelsen av PCR-metoden for polymerasekjedereaksjon krever den strengeste overholdelse av alle stadier av analyse, alt fra prøvetaking av analytikeren for å tolke analysens resultater. Hvordan informativ PCR analyse avhenger av mange forhold.

  • Falske positive testresultater kan skyldes at blodet kommer inn i materialet (smør eller skraper urinrøret).
  • Lignende falske positive resultater av PCR-analyse oppnås på grunn av ikke penetrering av epitelceller i materialet, men til innholdet av en stor mengde fullstendig ikke-informativ slim.
  • Feil transport og lagring av de oppnådde prøvene har en effekt på å oppnå falske resultater av DNA-analyse. Infeksjonens DNA i dette tilfellet kan bli ødelagt og som et resultat et falsk-negativt resultat.
  • Forstyrrelse av sterilitet under PCR-diagnostikk er en annen årsak til falsk positiv PCR. Alienbakterier kan komme inn i pasientens samlede materiale fra legenes hender, fra klær, fra glass eller forurensede instrumenter, gjenbrukbare redskaper. Som et resultat vil en "ikke-eksisterende" infeksjon bli oppdaget.
  • Uvirksomhet av reagenser. Et ikke-utstyrt og tidlig laboratorium, hvor leger "lukker øynene" til uegnethet av reagenser, er en annen og alvorlige grunner til en falsk diagnose. Dette reduserer selvsagt kostnadene ved laboratoriediagnostikk, men det kan ikke bare påvirke resultatene.

Del ny informasjon med venner og bekjente i:

Hva er bedre og mer effektivt i laboratoriediagnostikk - PCR eller ELISA analyse?

PCR og ELISA er to diagnostiske metoder som har vunnet anerkjennelse blant medisinske fagfolk. Begge studier fra kategorien molekylær biokjemi - nøyaktig og pålitelig. Det er forskjell mellom PCR eller ELISA, som karakteriserer patologien bedre og sannferdig? For å svare på spørsmålet, er det nødvendig å forstå essensen av teknikkene, for å identifisere likheter og forskjeller i diagnostiske metoder.

Hva er PCR?

PCR er en svært sensitiv polymerasekjedereaksjon som vil påvise kausjonsmiddelet til sykdommen (virus, bakterier, klamydia) i kroppen. Teknikken er basert på bestemmelsen av den spesifikke strukturen av DNA tilstede i infeksjonen. PCR utføres i tilfelle mistanke om latent kronisk infeksjon i kroppen, som er i latent form. Funksjonene og fordelene med PCR inkluderer:

  • høy 100% følsomhet for forårsakende midler av hvilken som helst type med nærvær av unike nukleinsyrefragmenter;
  • hastigheten på å oppnå resultatet;
  • evnen til å bestemme antall en type patogen;
  • Samtidig diagnose av flere patogener.

Laboratorieassistenter kan enkelt bestemme strukturen av et enkelt patogen ved hjelp av polymerasekjedereaksjonen, som gjør det mulig å overvåke og evaluere resultatene av behandlingen etter forskrivning av medisinering. PCR, som en ny metode for forskning, er uunnværlig for diagnostisering i slike sykdommer:

  • tuberkulose;
  • difteri;
  • salmonellose;
  • HIV;
  • AIDS;
  • hepatitt C selvstendig stadium
  • bacteriosis.

Hva er ELISA?

ELISA er en immunmetode for forskning og en nøyaktig analyse for å identifisere patologier i kroppen forårsaket av smittsomme patogener. Studien er foreskrevet for mistenkt:

  • syfilis;
  • hepatitt B, C;
  • klamydia;
  • toksoplasmose;
  • cytomegalovirus;
  • herpes virus;
  • ureaplasmosis;
  • kvinnelig mykoplasmose.

Immunofer kan oppdage onkologi på et tidlig stadium. ELISA er foreskrevet for å oppdage nivået av hormoner i blodet, diagnostisere sykdommer i det endokrine systemet ved å detektere tumormarkører. Immunoassay har mange fordeler:

  • enkelhet og fart;
  • høy følsomhet i antigen-antistoffreaksjoner selv mot bakgrunnen av en lav konsentrasjon av patogenet i kroppen;
  • et høyt nivå av spesifisitet av analysen som gjør at du raskt kan oppdage og installere antigen-antistoffkomplekset, vil enzymet som brukes, være en etikett som nøyaktig kan fange signalet for interaksjonen mellom dem, gjenkjenne immunglobuliner (antistoffer igm, igg) i blodet.

Når det gjelder infeksjon av legemet i begynnelsen, overveier klasse M immunglobuliner. Etter hvert som infeksjonen utvikler seg, går klasse A-antistoffer sammen. Hvis sykdommen går inn i det avanserte stadium, begynner produksjonen av klasse G immunoglobulin. Immunoglobulin-enzymreaksjonen vil avsløre sykdommens alvorlighetsgrad og stadium av patologi.

Hva er forskjellen mellom ELISA og PCR?

Analyser av PCR og immunofermetny (IFA) er like etterspurt etter diagnostiske formål. Begge studiene har fordeler og ulemper, likheter og forskjeller.

  1. ELISA. Hovedretningen er deteksjon av avfallsprodukter av markørproteiner eller etablering av kontakter mellom patogenet og immunsystemet. Nektelse eller bekreftelse av spredning av infeksjon i organene. Forskjellen mellom ELISA og PCR er egnet for ethvert biomaterial for analyse: en prøve av vev, spytt, urin og blod.
  2. PCR lar deg identifisere et bestemt patogen tilhørende gruppen sopp, virus, bakterier. Polymerase-diagnostiseringsmetoden vil oppdage den patogene organismen i materialet som studeres: væske, vev, organ. For å få et stort bilde av de patologiske prosessene som forekommer inne i kroppen, foreskriver legene to typer analyser samtidig i komplekset. Dette er viktig for å oppdage STDs (patologier overført gjennom samleie).

For å fastslå nøyaktig den seksuelt overførte smittsomme sykdommen og nivået av antistoffer i blodet, utføres første PCR, fordi resultatene av ELISA ikke kan tas som grunnlag for forskning uten å oppnå primære data.

Når det oppdages antistoffer i kroppen ved en ELISA, er det umulig å si sikkert: om den patologiske prosessen i kroppen skjer eller ikke. Det kan ha vært kontakt med patogenet, men langt i det siste, og analysen kan gi et falskt resultat.

Du kan ikke gjøre entydige konklusjoner om PCR eller ELISA, og det er faktisk mer pålitelig. ELISA er en effektiv diagnostisk metode, men bare PCR kan bekrefte sannsynligheten for å utvikle en sykdom, så det er rimelig å gjennomføre begge studiene sammen. PCR er en mer nøyaktig testmetode, men i en prøve av vevsmateriale og i et eget område av kroppen. Til tross for nøyaktigheten av teknikken, oppstår ofte feil, fordi den smittsomme prosessen raskt kan spre seg gjennom hele kroppen.

Forskjellen mellom studier

Hold styr på fremgangen, for eksempel: klamydia gjennom livmorhalskanalen, det er vanskelig. Infeksjonen kan være fraværende i eggstokkene og egglederne, når testen for ELISA gir et positivt svar, og testen for PCR-negativ. Det skjer det motsatte. For et 100% resultat utføres begge testene for PCR og ELISA best sammen.

Det skjer at resultatene av PCR eller ELISA ikke samsvarer, noe som skjer med lang kronisk infeksjon eller avhengighet av kroppen til dens innflytelse. I dette tilfellet er ELISA negativt og PCR er positivt. Hvis det er noen mikrober i smøret, men antistoffer dannes og titrene holdes lenge i blodet selv etter behandlingen, vil ELISA være positiv og PCR vil være negativ.

Ofte gir metodene falske positive unøyaktige svar når, for eksempel: ELISA er positiv, er PCR positiv. Pasientens symptomatologi tas i betraktning om de har blitt behandlet for infeksjoner. Tross alt skjer det at PCR er negativ og ELISA er negativ.

Ulike kliniske tilfeller krever en individuell tilnærming. Derfor, hvilken analyse er bedre å utføre og hva som er mer nøyaktig: PCR eller ELISA - beslutningen er gjort av den behandlende legen.

Kontrolleres for tilstedeværelse av skjulte kjønnsinfeksjoner og testes fortrinnsvis med en partner. Tross alt skjer det at man klart viser løpet av den inflammatoriske prosessen, mens den andre ikke engang har mistanke, noe som påvirker sexlivet negativt og forårsaker mistillit. Det er alltid bedre å konsultere en lege og behandle begge parter for å øke effektiviteten av behandlingsforløpet og forkorte behandlingstiden.

For eksempel: med ureaplasmose og mykoplasmose kan gode resultater fra behandling av inflammatoriske prosesser i bekkenet bare oppnås ved gjennomgåelse av en felles behandlingskurs.

Med hensyn til spesifikasjonene kan det konkluderes med at PCR-diagnostikk og ELISA har en forskjell, men begge metodene er i stand til på en pålitelig måte å bestemme forekomsten av patologier. Imidlertid kan kun spesialister identifisere forskjellen mellom metodene, velge virkelige og korrekte metoder for diagnostikk, tydeligere dekke analysens resultater.

Du kan lære mer om PCR-metoden fra videoen:

Typiske feil i diagnosen av polymerasekjedereaksjon

Laboratoriediagnostikk på grunnlag av polymerasekjedereaksjonen (PCR), på grunn av sin hastighet og høy følsomhet, får stadig større utvikling. Til tross for metodenes enkelhet og bekvemmelighet er det imidlertid en rekke forhold, hvis feil kan føre til et upålitelig eller falskt resultat.

Enkel ved første øyekast, har metoden en rekke "fallgruver", som en eller annen måte nesten alle laboratoriespesialister har å håndtere. Manglende erfaring med bruk av denne teknikken, samt stereotyper for å tenke på personell som tidligere har arbeidet i biokjemiske eller bakteriologiske laboratorier, der det er forskjellige arbeidsbehov, kan føre til ulike feil. Som følge av slike feil kan falsk-positive, falsk-negative eller upålitelige testresultater oppnås.

Alle feil i laboratoriepraksis kan deles inn i tre klasser:

  • preanalytiske fasefeil;
  • feil i analysestadiet;
  • postanalytiske fasefeil.

Feil i det preanalytiske stadium av PCR-diagnostikk

Tar biologisk materiale

Chlamydia trachomatis kan påvirke epitelet av slimhinnen i urogenitalt tarmkanal, epitel av øyets bindekinne og synovialhulen. Derfor, hvis urogenitalt klamydia mistenkes, skal materialet for studien skrape fra urogenitalt tarm, med øyeskader hos nyfødte - skraping fra øyet i øyet, med klamydialgikt - punktering av synovialvæske.

Mycobactrium tuberkulose kan påvirke nesten ethvert organ og vev av menneskekroppen, dvs. materialet til studien bør ikke være det samme for forskjellige former for den patologiske prosessen.

Således, hvis et barn har klamydia i øynene, og det tas en prøve fra urogenitalkanalen, og sputum tas for nyre-tuberkulose, vil et negativt resultat ikke utelukke faktum av infeksjon hos pasienten.

Den andre feilen i det preanalytiske scenen er feil innsamling av materiale til forskning.

Generelle krav til biologisk materiale er maksimal konsentrasjon av mikroorganismer i prøven, samt fraværet av uønskede urenheter som hemmer PCR.

For eksempel er Chlamydia trachomatis en obligatorisk intracellulær parasitt, derfor må det studerte materialet inneholde et stort antall epitelceller [4]. Det er, når du tar materiale for å identifisere disse mikroorganismer, er det nødvendig å skrape, ikke et smøremiddel, fordi Chlamydia trachomatis smears ikke vil bli oppdaget, selv om de er i kroppen i betydelige mengder.

Når du tar materiale fra urogenitalkanalen, er det nødvendig å unngå å hemme urenheter som slim, blod eller pus. For å gjøre dette, tar skrapinger ikke før to timer etter urinering, tar kvinner hensyn til syklusens dager [1]. For mye slim eller pus må fjernes med en steril bomullspinne rett før du tar biomaterialet. Det er ønskelig å ta materialet med spesielle plastprober, noe som reduserer sannsynligheten for at blod i prøven, i motsetning til wadded seg, ikke sorberer transportmediet og materialet som studeres. [1]

Biologisk materialebehandling

Riktig inntak av urogenitalt skraping er en smertefull prosedyre for menn og barn, så for studien kan du bruke den første delen av morgenurinen som inneholder maksimal epitel. [1] I fremtiden må du oppnå et cellulært urinsediment. Imidlertid inneholder sedimentet en stor mengde salter og urea, som ved hjelp av fluorescensdetekteringsteknologi, denatureringsprober, som kan føre til falske positive resultater. Derfor må urincellesedimentet skylles med fysiologisk saltoppløsning uten å mislykkes. [4]

Den neste feilen i det preanalytiske stadiet er feil behandling av tatt blod For å hindre blodpropp i leveringsprosessen må du bruke antikoagulantia. Mange laboratorier bruker heparin som antikoagulant. Imidlertid hemmer heparin kraftig PCR, og uansett hvilket testsystem som brukes og prøvefremstillingsmetoden, vil alle resultater for prøven som inneholder det, være upålitelig ved intern kontroll av PCR eller negativ, uavhengig av den virkelige tilstanden ved intern kontroll nei [3]

Lagring av biologisk materiale

Feil i det analytiske stadiet av PCR-diagnostikk

Feil i arbeidet

Feil i analysestadien er vanligvis forbundet med uoppmerksom lesing av instruksjonene som er festet til settet for testing av PCR-analyse.

En av disse feilene er feil valg av prøvepreparasjonssystemet. Bruken av raske metoder for komplekse biomaterialer, for eksempel blodplasma, er for eksempel mindre farlig, fordi i dette tilfellet er falske resultater trolig på grunn av at PCR-hemmere gjenstår i prøven, noe som igjen vil tvinge QDL-spesialisten til å gjenta eksperimentet og finne ut grunnen svikt. Det er langt mer farlig hvis noe eller alt av patogenens DNA eller RNA, på grunn av et feil valgt testsystem, går tapt under prøvepreparasjonsprosessen - i dette tilfellet er det risiko for å oppnå et falsk-negativt resultat.

Den andre feilen er feil forberedt bakgrunnsrør for testsystemer med fluorescensdeteksjon ved sluttpunktet. Dette skyldes oftest at laboratorieansatte glemmer å forandre dem når en ny serie reagenser vises eller ikke gjør dette av økonomiske årsaker. Det er mulig at de samme komponentene i reaksjonsblandingen nesten ikke vil ha forskjellige nivåer av fluorescens, men i forskjellige serier av reagenser kan konsentrasjonene av komponentene og høy sannsynlighet for forskjellige nivåer av fluorescens variere. Dermed kan en feil som i noen tilfeller overses, i andre gi et stort antall upålitelige resultater.

En annen feil forbundet med feilaktig fremstilling av bakgrunnsrør er tilsetning av polymerase til dem. Dette kan skje både ved en tilfeldighet og på grunn av at laboratorietekniker ikke fullt ut forstår hvorfor det ikke er nødvendig å legge til polymerase. Det kan være to scenarier: Hvis testsystemet ikke inkluderer intern kontroll eller en buffer som ikke gjennomgår et valg, brukes som en negativ kontrollprøve, og hvis testsystemet inkluderer en intern kontroll som er under paraffin og / eller en negativ prøve, passerer scenen tildeling. I det første tilfellet kan tilsetningen av polymerase ikke påvirke resultatet betydelig, men i dette tilfellet er det risiko for forurensning, både positiv og intern. I andre tilfelle er alle negative verdier upålitelige. Det er ikke et problem å oppdage en feil, siden normaliseringsverdiene er svært høye, nær 103, og fluorescensverdiene i noen reagensrør er mye lavere enn 1.

forurensning

Problemet med forurensning oppstår når laboratoriet er feil organisert eller når det er uforsiktig å behandle positive prøver. Så, når du bruker gelelektroforese som en deteksjonsmetode, må rommet for det nødvendigvis ha en egen inngang og et ventilasjonssystem. Ellers er sannsynligheten for at amplikonene fra åpningsrørene faller inn i andre rom svært høye. Dette kan føre til at over tid vil flere og flere studerte prøver for hyppige infeksjoner være positive. På samme tid, i de tidlige stadiene av slik forurensning, kan den negative kontrollen forblir ren, siden forekomsten av falske positive resultater er av statistisk art.

I tilfelle fluorescerende deteksjon åpnes ikke prøverørene og teoretisk er sannsynligheten for forurensning nær null, men muligheten for å åpne den er ikke utelukket. Derfor er det bedre hvis forsterkningen og deteksjonen blir utført i et separat rom, så vil et rom bli forurenset i tilfelle en uforutsette situasjon.

En annen feil som fører til forurensning av prøver, er assosiert med unøyaktig behandling av både kliniske prøver og positive kontrollprøver og standarder. Noen laboratoriespesialister bruker et enkelt tips for å spare penger når man legger til samme stoff i et stort antall rør. Dette er normalt hvis rørene er tomme eller innholdet er det samme (fremstilling av amplifikasjonsrør). Imidlertid, hvis en prøve er i et reagensrør, som for eksempel under prøvetilberedelse, øker innføringen av selv den samme løsningen i forskjellige rør risikoen for DNA-overføring mellom rør - den såkalte kryssforurensningen. For å forhindre krysskontaminering anbefales det også at filtertips brukes til å introdusere prøver som potensielt inneholder DNA.

I tillegg, når du arbeider uforsiktig, er det fare for å introdusere hemmere i prøven (for eksempel talkum med hansker).

Feil ved tolking av resultatet

Når det gjelder feil i tolkingen av resultatene, er det fornuftig å vurdere ulike deteksjonsmetoder.

Når det oppdages ved hjelp av gelelektroforese, er det en risiko for å akseptere ikke-spesifikke fragmenter som spesifikke, hvis de er nært i lengden, og det er ingen mulighet for klart og entydig å sammenligne positiv kontroll og helst med en lengdemarkør. Også da prøver ofte påføres gelen med en enkelt spiss, er det risiko for forurensning selv i deteksjonsfasen hvis spissen ble dårlig vasket eller en av prøvene syntes å ha en meget høy konsentrasjon av DNA. Denne typen forurensning blir enkelt overvåket dersom båndet blir observert i en bevisst negativ prøve, men det kan ikke skille seg fra forurensning i laboratoriet og krever omprøving av alle prøver.

En av tolkningsfeilene som er forbundet med bruken av sluttpunkts-fluorescensdeteksjonsmetoden er uoppmerksomhet til normaliseringsverdiene til bakgrunnsrørene og til fluorescensverdiene i negative prøver. Så hvis feil lagret, kan prober i bakgrunnsrørene bryte ned, og normaliseringsverdiene øker betydelig fra noen få timer til flere dager, mens fluorescensverdiene i prøvene viser seg å være mer eller mindre undervurdert. Hovedkriteriet for påliteligheten av resultatene oppnådd i dette tilfellet kan være negative prøver. I fravær av uoverensstemmelser mellom bakgrunns- og amplifikasjonsrør har negative prøver fluorescensverdier nær enhet eller, i sjeldne tilfeller, litt høyere. Hvis fluorescensverdiene i en eller flere prøver eller en negativ kontroll er betydelig lavere enn enhet, kan det hevdes med stor sannsynlighet at bakgrunnsrørene ikke stemmer overens med denne studien, i dette tilfellet er det nødvendig å endre dem.

I tillegg til eksemplet ovenfor kan det hende at bakgrunnsfluorescensen øker i amplifikasjonsrørene, mens i bakgrunnsrørene forblir fluorescens uendret. Denne situasjonen kan oppstå når amplifikasjonsrørene lagres ved romtemperatur. I dette tilfellet vil innholdet av positive resultater med lave fluorescensverdier øke. Resultatene blir lært det samme som for forurensning i laboratoriet, men i så fall vil alle lave fluorescensverdier være omtrent det samme som i tilfelle av forurensning er ganske sjelden, siden det ikke er sannsynlig at like mange fremmede materialer vil falle inn i alle negative rør. Det er lett å unngå dette hvis du bytter bakgrunnsrørene en gang i måneden eller et og et halvt. I dette tilfellet er det i regel ikke nok tid til en tilstrekkelig stor forskjell å vises mellom de allerede forberedte bakgrunns- og amplifikasjonsrørene.

Feil i den postanalytiske PCR-diagnostiske fasen

Feil ved den endelige, postanalytiske scenen er forbundet med legenes feilfortolkning av resultatene av PCR-analyse på grunn av feilaktige ideer om det smittefarlige middel eller metodens muligheter.

Eksempelvis vil en kontrollundersøkelse av klamydia 1 uke etter slutten av antibiotikabehandling gi et positivt resultat. Legen vil avgjøre om ineffektiviteten av terapien. Imidlertid kan den endelige konklusjonen gjøres ikke tidligere enn 4-6 uker etter at epitellaget er erstattet, hvor mikroorganismen parasitiserer. [1] Tidligere diagnostikk kan vise et feilresultat, siden døde mikroorganismer fortsatt forblir i epitelceller.

Ved omvendte forskningsresultater er et "immunologisk spor" mulig - et gjenværende nivå av antistoffer, som hos enkelte mennesker kan vedvare i mange måneder og til og med år etter utvinning, eller under PCR, er ikke tatt hensyn til artsspesifikiteten i testsystemene.

Hva er PCR? Falsk positiv PCR

Diagnostikk på grunnlag av polymerasekjedereaksjon, dukket opp for 30 år siden, takket være forskning fra den amerikanske forskeren Carrie Mulles. Metoden har blitt utbredt og har blitt et gjennombrudd i mikrobiologisk forskning.

Generelt tillater teknikken foreslått av Mulles kloning av gener. Essensen av det mikrobiologiske diagnostiske verktøyet som ble avslørt som et resultat av forskningen, er som følger. Blant den enorme mengden geninformasjon ble det mulig å finne en bestemt mikrosite med den nødvendige DNA-koden. Dette fragmentet, ved bruk av DNAs naturlige evne til å replikere (reproduksjon), blir deretter klonet gjentatte ganger.

Hele prosessen foregår in vitro. Prøvemultiplikasjon utføres ved anvendelse av et polymeraseenzym. To prøver, tatt for en bestemt del av DNA, kam gjennom løsningen på jakt etter komplementære seksjoner og bli med dem. Formet startsted, som senere kopieres. Det er det som PCR er.

Naturlig gjengivelse av DNA forekommer konstant i alle levende organismer. Den relativt unge diagnostiske metoden beskrevet ovenfor lar deg håndtere denne prosessen. Videre er effekten ikke på hele molekylet som helhet, men bare på en bestemt del av nukleinsyren (DNA). Reaksjonen gjentas, og øker fragmentariske deler av DNA eksponentielt, så reaksjonen kalles en kjede.

For at kjedereaksjonsprosessen skal lanseres, må et fremmed element være tilstede i biomiljøet samlet for analyse, ellers vil det ikke bli reaksjon.

Anvendelsesområder

Diagnostiske studier basert på CRP brukes med hell, primært i medisin. Denne metoden lar deg identifisere infiserte celler og genetiske sykdommer. Pulmonologer har evnen til å identifisere virale typer lungebetennelse og tuberkulose. I praksis med gynekologi og urologi er det mulig å utføre forskning for å bestemme sykdommer som tidligere kunne gå ubemerket hos pasienter i mange år, for eksempel ureaplasmose og klamydia. For tiden brukes polymerasekjedereaksjonsmetoden til å diagnostisere smittsomme sykdommer i nesten alle områder av medisin.

Forensiske studier av denne typen er også uunnværlige. Ved å analysere DNA tatt fra biologisk materiale som forblir på forbrytelsesscenen, kan spesialister bestemme involveringen av enkelte individer. Saker når lovbryteren ikke etterlater spor, sletter fingeravtrykk, har lenge blitt historie.

Selv uten å møte PCR-konseptet, hva det er uten å vite, var mange i stand til å oppleve fordelene med denne diagnostiske metoden. Slike studier kan oppdage enkeltpatogenceller, som er utenfor kraften til andre immunologiske og bakterielle diagnostiske metoder. Reaksjonen varer bare noen få timer, det gir deg mulighet til å gi resultatet i løpet av arbeidsdagen.

Feil i forskningsresultater

Under laboratoriets daglige arbeid oppnås en stor mengde DNA-materiale i reagensrør. Forstyrrelse av biomaterialets forskningsprosess kan føre til et falskt positivt eller falskt negativt diagnostisk resultat. Brudd på reglene i minst ett av stadiene av en kjedereaksjon kan føre til et falskt resultat.

En lege som gjør biomaterialer må være oppmerksom på hans plikter. Smører eller skraper bør ikke inneholde fremmede elementer, som blodceller. På samme tid, for en fullverdig studie, er tilstedeværelsen i materialet til et tilstrekkelig antall epitelceller nødvendig, og urettferdig oppsamlet materiale vil inneholde en stor prosentandel av uinformativt slim.

I stor grad påvirkes det falske positive resultatet av PCZ av metoden for transport og lagring av infiserte DNA-celler. På grunn av brudd på de teknologiske kravene til prosessen med å gjennomføre alle stadier av studien, kan det infiserte materialet bli gjenstand for ødeleggelse eller endring i strukturen, noe som gjør det umulig å utføre reaksjonen.

Som alle andre laboratorietester krever polymerasekjedereaksjonen riktig bearbeiding av alle anvendte instrumenter. Laboratoriet og personellet må observere sterilitet i alle stadier av diagnostiske studier. Manglende overholdelse av sanitære normer kan føre til påvisning av en fremmed infeksjon, henholdsvis, og til et falskt positivt resultat av undersøkelsen.

Av stor betydning for kvaliteten på arbeidet som utføres er brukte reagenser. For diagnose ved bruk av polymerasekjedereaksjonen plasseres DNA i en nukleotidoppløsning. Alle stoffer må være brukbare. Billigere prosess fører til en reduksjon i nivået av effektiviteten.

Diagnostisk metode basert på PCR gir et 100% resultat. Men på grunn av at materialene som brukes er svært følsomme for alle slags faktorer, kan bare et kvalifisert laboratorium gi et helt riktig resultat.

PCR-testresultater

PCR-studier har lenge vært en del av laboratorie- og diagnostiske studier av ulike sykdommer.

I flere tiår med utvikling og forbedring har teknikken blitt uunnværlig for dermatovenerologisk service.

I denne artikkelen vil du lære

Hva er PCR-studiene og deres resultater.

Polymerasekjedereaksjon er en diagnostisk metode som gjør det mulig å identifisere årsaken til en sykdom.

Den ønskede faktor er de unike sekvensene av genetisk materiale som er tilstede i den mikrobielle cellen av bare en art eller stamme av patogene mikroorganismer.

Ofte er formålet med studien DNA av en bakterie eller et virus, men PCR-metoden gir også resultater på RNA av mikroorganismer.

Hva er forskjellige biologiske materialer brukt til:

  • spytt
  • vevbiopsi
  • urin
  • cerebrospinalvæske
  • blodet
  • slimhinneskraping

Resultatene av PCR-diagnostikk er

Data om forekomst eller fravær av sykdommen er den enkleste, tilgjengelige informasjonen.

Det er PCR-teknikker, og resultatene av disse, i tillegg til å etablere faktumet av infeksjon, tillater å evaluere infeksjonens aktivitet, sykdommens dynamikk og responsen på behandlingen.

Dette alternativet kalles "real-time polymerase chain reaction", og brukes mye til pasienter med blodoverførbare kroniske virusinfeksjoner - hepatitt, HIV.

Den største fordelen med teknikken er den høyeste følsomheten og spesifisiteten.

Slike analyser er raske og svært nøyaktige.

Ved å presentere pålitelige data kan du begynne behandlingen så tidlig som mulig.

PCR-studien består av tre trinn:

  • Prøveberedning etter å ha tatt materialet.
  • Den faktiske polymerase-reaksjonen, som består i flere kopieringsfragmenter av materialet.
  • Tolkning av resultater.

PCR-testresultater er positive dersom det mistenkte patogenet oppdages.

Hvis ikke, er resultatet negativt.

Som sådan er det ingen godkjent form for testresultater.

Dette skyldes det faktum at studien og fikseringen av data holder datamaskinen.

Følgelig er grafene og dataene i skjemaet skrevet inn som angitt av programvaren som enheten bruker.

Derfor må deklarering av testresultater kreve spesiell trening og erfaring fra legen.

I tilfelle når en realtids-polymerasekjedereaksjon utføres, er antallet påvist kopier av det genetiske materialet til mikroorganismen indisert separat i form av testresultater.

Selvfølgelig, hvis de vil bli identifisert i prinsippet.

Positivt resultat

Alle årsaksmessige midler til seksuelt overførbare sykdommer og blodbårne infeksjoner (hepatitt, HIV), begynner en gang i kroppen å formere seg, men det manifesterer seg ikke.

Her finner du den såkalte inkubasjonsperioden eller torpid, latent infeksjon.

I slike tilfeller finner PCR fremdeles genetiske markører av patogener i det diagnostiske materialet innen få dager fra infeksjonstidspunktet.

For at analysen skal bli positiv, er et enkelt DNA-molekyl eller RNA av den patogene mikroorganismen i det oppsamlede diagnostiske materialet tilstrekkelig.

For mange tidlige enheter er det en teknologisk terskel for følsomhet på 40 mikroorganismer.

Men som regel, hvis en person er virkelig infisert med en eller annen veneral sykdom eller STD, så er hans patogener i prøvene mer enn dette tallet, og analysen vil være positiv.

Negativt resultat

I stor grad er dette alternativet mulig i to tilfeller: En person er ikke smittet eller diagnostisk materiale er feil innsamlet.

Det kan selvsagt ikke utelukkes at konsentrasjonen av patogener i testprøven kan være lavere enn terskelen for apparatets følsomhet.

Men en slik situasjon er ekstremt sjelden, og hvis legen er i tvil, kan analysen alltid gjentas etter en stund.

Hvis resultatene av PCR-diagnostikk forblir negative, er personen frisk.

Ellers, når du mottar den andre testen positiv, betyr det at pasienten er infisert og det er nødvendig å starte behandlingen.

For å dechiffrere resultatene av PCR-analyse, bør den behandlende legen

For å dechiffrere resultatene av PCR-analyse, bør den behandlende legen som vet løpet av behandlingen.

Ideelt sett bør den være den samme spesialisten som samler diagnostisk materiale til studien, kan observere pasienten og følge alle endringer i menneskers helse.

Dessverre er det kliniske kurset av moderne karsykdommer og infeksjoner svært forskjellig fra den klassiske.

I slike tilfeller bør selv resultatene av PCR-analyser støttes av data fra andre studier:

  • mikroskopi av smeden av kjønnsutslipp, fra urinrøret
  • serologiske blodprøver for antistoffer mot bestemte patogener (ELISA, TPHA og andre)
  • kultur såing

Situasjoner der dataene fra ulike metoder motsetter hverandre, er heldigvis ofte ikke funnet. For eksempel - PCR er positiv, og ELISA er positiv.

Dette skjer på slutten av pasientens behandling, når de patogene mikroorganismer allerede er ødelagt og ikke finnes i menneskekroppen.

Men antistoffer (immunoglobuliner) til antigener av smittsomme stoffer sirkulerer fortsatt i blodet i flere uker eller til og med måneder, år.

I klinisk utvinning tolkes denne uoverensstemmelsen til fordel for PCR, siden resultatene er mer nøyaktige enn studier basert på antistoffer.

Kultur såing regnes som den mest følsomme, men for å få sine resultater må du vente flere dager eller til og med uker.

Derfor utføres bakteriologisk undersøkelse bare når PCR ikke gir et garantert nøyaktig svar.

Det er viktig å kunne sammenligne de data som er oppnådd, og de kliniske egenskapene i infeksjonen.

Så i noen tilfeller er resultatet av PCR positivt, selv om patogenet vellykkes elimineres av immunsystemet.

Som pasienten har nettopp fullført behandlingen, er de døde patogene mikroorganismer fortsatt bevart i kroppen.

Deres genom vil bli oppdaget, men uansett, så betyr et positivt resultat ikke forekomsten av sykdommen.

En falsk negativ PCR-analyse er mulig:

  • med feil tilnærming til pasienten
  • tar materiale ikke fra det ønskede biologiske miljøet

Det er veldig viktig å nøye avklare alle detaljer og nyanser av sykdommen.

Spesiell oppmerksomhet bør gis til hva og hvordan personen som ble brukt fra det øyeblikket de første symptomene syntes å søke profesjonell medisinsk behandling.

For eksempel - antibiotika som kan kjøpes på et apotek.

Selvmedikering fører ofte til en betydelig reduksjon i antall mikrober, noe som kan forårsake et falsk-negativt PCR-resultat.

Det vil si at en persons, en leges rolle bare reduseres for å samle inn diagnostisk materiale korrekt og deretter dechifrere de oppnådde resultatene.

Diagnostiske evner av metoden

Denne metoden for laboratorieforskning er svært allsidig.

Det er en PCR-diagnose:

  • seksuelt overførbare infeksjoner.
  • Også noen patogener av respiratoriske sykdommer (kikhoste, bronkoseptikose)
  • spesielt farlige infeksjoner (HIV), hepatitt
  • forårsakende midler av tarminfeksjoner (rotavirus, salmonella, Helicobacter pylori)
  • influensavirus og andre
Forrige Artikkel

Hepatittforum

Neste Artikkel

Chesnachki.ru